給予動物鼠籠傾斜、潮濕墊料、高溫、噪音、束縛、電擊、游泳、晝夜節律顛倒等不同刺激因子，且刺激因子安排為多變性和不可預測，可誘導性是模型制造成功的關鍵。該模型被廣泛用于抑郁癥神經生物學機制及抗抑郁藥物的研究，以及伴發的焦慮、學習記憶障礙及防護藥物研究。

本研究中，通過水迷宮實驗、避暗實驗結果可以看CUMS模型組水迷宮尋臺潛伏期顯著性延長，避暗錯誤次數顯著性增加、避暗潛伏期顯著性減少等，這些行為學結果，提示大小鼠CUMS模型成功。此外本實驗還對CUMS模型的機制進行了基礎研究，認為CUMS模型會導致動物皮層的5-HT、DA、Ach、NE等神經遞質水平顯著性降低（P<0.05）。因此我們認為采用慢性不可預測應激，35天可以造成大鼠和小鼠學習記憶障礙。

模型技術難點在于對于CUMS刺激因子的選擇，刺激因子的選擇可能影響實驗模型的成功與否，常用的刺激因子有禁食(12 h)、禁水(12 h)、冷水游泳(4 °C，5 min)、熱水游泳(42 °C，5 min)、動物叫聲(0.5 h)、束縛(使用自行研發的小鼠行為限制器，長20 cm，直徑7 cm)、晝夜顛倒、配對飼養、濕籠、傾籠等。每日選擇2~3 種刺激，并盡量使應激程序符合不可預測的特點，以避免動物產生適應性。相同的刺激因子應該隔3-7日再進行。

本研究通過不同的刺激因子對老鼠造成慢性不可預測應激模型，通過水迷宮、避暗等經典行為學指標，以及5-HT、DA、Ach、NE等神經遞質基礎機制指標，表明了慢性不可預測應激誘導老鼠學習記憶損傷模型的成功，并且該模型對于大小鼠具有相同的效果，本模型可用于進一步的改善學習記憶藥物的藥效學評價。

本實驗采用健康成年SPF級老鼠。飼料墊料均為高壓滅菌產品，購自北京維通利華實驗動物有限公司，動物用水均經過除菌處理。實驗動物以完整的包裝直接進入實驗室，觀察適應5天后無異常情況，方進行實驗。實驗過程中動物操作均符合動物倫理學規范，對環境和生態影響等符合國家相關法律規定。

1、注射過表達α-synuclein腺相關病毒的恒河猴行為學表現

Viewpoint視頻監測系統檢測動物運動量

在腦立體定位注射過表達α-synuclein的腺相關病毒手術后，通過Viewpoint視頻系統對動物進行運動量檢測，注射AAV-MBP-SYN的模型動物結果。

注射Olig001-CBH-SYN的模型動物結果。

構建過表達α-synuclein的腺相關病毒AAV-MBP-SYN及Olig001-CBH-SYN，分別以AAV-MBP-GFP及Olig001-CBH-GFP作為其對照，通過腦立體定位注射的方法注射到恒河猴（4-5周歲，體重3.5-5.5公斤）紋狀體內，從而建立多系統萎縮的恒河猴模型。每只動物注射100μl，滴度為5×1012gcp/ml。

一、疾病名稱

多系統萎縮（Multiple system atrophy，MSA）

二、MSA簡介

臨床癥狀主要特征為植物神經功能紊亂，震顫，運動緩慢，肌肉僵硬，體位不穩和共濟失調等。

病理表現主要為大腦多個部位（包括基底神經節，橄欖下核和小腦）的神經細胞變性、脫失和膠質細胞增生，在少突膠質細胞和神經元的細胞核、胞漿中存在嗜銀包涵體。病變最嚴重的部位主要位于錐體外系（殼核、尾狀核、蒼白球、黑質、丘腦底核）、腦干（藍斑、下橄欖核、腦橋核、迷走神經背核、前庭核）、小腦皮質、脊髓（中間外側核）和錐體系。MSA包括Shy-Drager綜合征（Shy-Drager syndrome，SDS）、紋狀體黑質變性（striatonigral degeneration，SND）和橄欖腦橋小腦萎縮（olivopontocerebellaratrophy，OPCA）三種類型

發病機制可能有兩條途徑：一是原發性少突膠質細胞病變假說，即先出現以α-突觸核蛋白（α-synuclein）陽性包涵體為特征的少突膠質細胞變性，導致神經元髓鞘變性脫失，激活小膠質細胞，誘發氧化應激，進而導致神經元變性死亡；二是神經元自身出現α-synuclein異常聚集，造成神經元變性死亡。

三、α-synuclein與MSA

膠質細胞胞漿包涵體（glial cytoplasmicinclusion，GCI）是MSA最具特征的病理改變。GCI呈新月、火焰狀或橢圓，由松散聚集的細絲組成，可包裹細胞器。GCI主要絲狀成分是α-synuclein，α-synuclein的突變可能在疾病發生過程中產生作用。α-synuclein基因（SNCA）rs11931074、rs3857059和rs3822086位點多態性可增加MSA患病風險。